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酵母菌菌株的保存培养与复苏实验
点击次数：299 发布时间：2022/9/22 11:32:09
酵母菌菌株的保存与复苏实验
实验材料 酵母菌
试剂、试剂盒 甘油DMSO
仪器、耗材 冻存管
实验步骤
1. 配制30%的甘油溶液，在每个15 mm×45 mm，4 ml 的带盖的冻存管中加入1 ml 甘油溶液，轻轻拧上螺盖，高压灭菌15 min。
2. 为了在冻存管中配制冻存菌液，加入1 ml 对数后期或静止早期的培养液，混匀后置干冰中一段时间，然后转存到-70℃冰箱中。
3. 复苏菌株时，可以从冻存管中刮下少量细胞划在平板上，不要将整个冻存管中的贮存液融化。
4. 细胞也可以按菌悬液加入80 μl DMOS的方式配制冻存菌株，贮存在-70℃。
酵母菌培养实验
实验材料 酵母菌
试剂、试剂盒 葡萄糖
仪器、耗材 摇床锥形瓶离心机
实验步骤
1. 在30℃，氧气充足和以葡萄糖作碳源的条件下，野生型酿酒酵母菌生长得十分良好。当酵母菌在试管中培养时，接种酵母菌贮液后应轻轻振荡培养液以便菌体细胞分散均匀。
2. 在作大体积液体培养时，酵母菌在锥形瓶中生长较好，使用瓶底具隔板的烧瓶增加进氧量更有利于酵母菌的生长。
3. 培养酵母菌时很重要的一点就是要保/证所有玻璃器皿无任何表面活性剂。还要保持良好的通气条件，培养液不应超过整个烧瓶总体积的1/5，而且置于300 r/min，30℃恒温摇床中进行培养。
4. 对于小量制备DNA和RNA，酵母菌可用玻璃或塑料试管培养，在试管中加入三分体积的培养基，并固定在摇床平台上，于350 r/min 转速振荡培养。
原创作者：上海岑特生物科技有限公司
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